植物干扰载体怎么起始转录（植物转化载体）

真核细胞转化中,外源（重组）基因都是要先整合到真核细胞的染色体上,然后才会表达.也就是说,外源基因的转录过程也是在细胞核中完成的.

例如最常用的酵母表达系统,导入酵母体内的重组表达载体只有和酵母染色体上的同源区发生重组（同源区等等都是载体上预先设计好的）,整合到染色体上,外源基因才能够稳定存在,外源蛋白才能得到稳定表达,这种整合的转化子一旦形成就非常稳定.如果转化后的重组表达载体未能整合到染色体上,而是以游离的附加体形式存在,这种转化子就不稳定,重组表达载体极易丢失.所以,载体必须整合入酵母基因组中才能实现异源蛋白的稳定表达.

又如农杆菌介导的植物转化,也是将表达载体的T-DNA左右边界间的外源序列稳定整合（插入）植物的染色体后,才能有效表达获得稳定的转基因植物.

简述原核生物的转录起始过程？大三

1.原核生物的转录起始过程。

转录即DNA指导下RNA的合成，转录起始过程形成第一个磷酸间磷酸二酯键。RNA聚合酶的一个因子专门辨认模板DNA上的起始位点，使DNA聚合酶全酶结合在起始位点上，形成起始全酶DNA－复合物，从而开始“起始反应”。转录开始此因子即从复合物上脱落，有核心酶催化RNA的合成。（那因子叫C各嘛，我不会打）

2.原核生物蛋白质蛋白质合成与真核生物蛋白质合成的异同点。

相同点：酶的性质相同，过程相似。

不同点：原核形成的MRNA为多顺反子，RNA聚合酶只有一种，以操纵子为转录的单位。真核形成的MRNA为单顺反子，RNA聚合酶有三种，转录时不涉及操纵子。

（时间不够了，下面的下次给）

“酶切-连接”方法是通常构建RNA干扰载体最常用的方法,被广泛应用于各种生物之中。其构建过程是：通过PCR方法得到目的基因的片段(添加了合适的酶切位点)，使之正反相连形成顺式片段和反式片段。

然后在顺反式片段之间插人一段中间间隔序列以增强基因沉默效果，最后将表达载体和RNA干扰片段相连接，形成可用于遗传转化的RNA干扰表达载体。

RNA干扰载体主要用来研究基因表达调控，RNA干扰技术已已被广泛用于基因结构功能研究和传染性疾病及基因治疗领域。

扩展资料：

在RNA干扰实验中，RNA干扰序列的选择会显著影响RNA干扰效果。按照以下几点指导原则选择RNA干扰序列:

1、推荐长度为19 nt采用21 nt序列也可以取得良好效果。

2、RNA干扰序列中不包含大于3 nt的连续相同碱基。

3、RNA干扰序列的GC含量为低到中等水平(推荐GC含量在35%到50%之间)。

4、不要将RNA干扰序列设计在已知的RNA-蛋白质结合位置附近。

5、确保RNA干扰序列与其它基因没有较高的同源性。

6、方向：在编码mRNA的正义链上选择RNA干扰序列。

参考资料：百度百科-RNA干扰

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